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NAD激酶(NADK)测试盒(比色法)
NAD激酶(NADK)测试盒(比色法)图片
货号: A117-1-1
参考价格: 910元/盒
包装: 50T/24样
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货号:A117-1-1
参考价格:910
产品别名:NAD kinase (NADK) test kit
NAD激酶测试盒(比色法)
产品介绍

测定原理:
       NADK催化NAD+磷酸化,生成 NADP+,NADP+可被6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原为NADPH;通过在340nm下测定NADPH的增加速率可反映出NADK活性的大小。

自备实验用品及仪器:
       水浴锅、离心机、可见分光光度计、1 ml 石英比色皿、可调式移液枪和蒸馏水。

试剂组成和配制:
提取液:液体 50ml×1 瓶,4°C 保存;
试剂一:溶剂 25ml×1 瓶,4°C 保存;
试剂二:溶剂 50ml×1 支,4°C 保存;
试剂三:粉剂×1 瓶,-20°C 保存;
试剂四:粉剂×1 瓶,-20°C 保存。

样品前处理:
       详见试剂盒内说明书关于样本处理的说明。测定组织、细菌和细胞时需要测定蛋白浓度。

测定步骤:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零;
2、将溶剂一与溶剂二在 37°C(哺乳动物)或 25°C(其他物种)水浴 15min 以上;
3、工作液 I 的配制:在试剂三中加入 12ml 溶剂一,充分混匀待用;现配现用;
工作液 II 的配制:在试剂四中加入 45ml 溶剂二,充分混匀待用,现配现用。
4、操作表

       试剂(μl)      测定管        对照管
        样本100100
       工作液一400
        试剂一
400

        充分混匀,在 37°C(哺乳动物)或 25°C(其他物种)水浴 15min,
立即煮沸 2min(盖紧以防水分流失),并与冷却,1000g,室温离心 10min,取上清

        上清液200200
       工作液二800800

加完试剂混匀后,室温静置 15 分钟在 340nm 下测定 30 秒的吸光值,计算ΔA=A 测定-A 对照。

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