S-α-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖，是纤维素分解酶系中重要组成成分之一，在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

S-α-GC能够催化对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有特征光吸收。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

产品组成：

溶液的配制：

1.试剂一：自备甲苯，4℃保存；

2.试剂二：临用前每瓶加入5ml蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存；

3.标准品：5mmol/L的对硝基苯酚溶液。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30-50目筛、研钵、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理(可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献)

新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。

二、测定步骤

1.分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至340nm，蒸馏水调零。

2.标准品：临用前用试剂三将标准品稀释50倍得100μmol/L的标准溶液。

3.加样表：

充分混匀，室温静置2min后，测定吸光值A，分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管。计算ΔA=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。每个测定管设一个对照管。

三、S-α-GC活力计算

单位的定义：每天每g土样中产生1μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-α-GC活力(U/g土样)=ΔA÷ (ΔA标准÷C标准)×V反总÷W÷T=0.444×ΔA÷ΔA标准÷W。

T：反应时间，1h=1/24d；V反总：反应体系总体积：1.85×10^-4L；C标准：标准溶液浓度，100μmol/L；W：样本质量，g。

注意事项:

若ΔA<0.01，可延长 37℃水浴时间；若ΔA>1.5，可将上清液稀释后进行测定；最后计算时注意各个因素的改变。

实验实例：

1.取两管 0.02g三叶草土，即为测定管和对照管，按照测定步骤操作，用 96孔板测得计算ΔA=A测定管-A对照管=0.421-0.238=0.183，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.473-0.047=0.426，计算酶活得：

S-α-GC活力(U/g土样)=0.444×ΔA÷ΔA标准÷W=0.444× 0.183÷ 0.426÷0.02=9.5366 U/g土样。

2.取两管 0.02g林土样，即为测定管和对照管，按照测定步骤操作，用 96孔板测得计算ΔA=A测定管-A对照管=0.374-0.225=0.149，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.473-0.047=0.426，计算酶活得：S-α-GC活力(U/g土样)=0.444×ΔA÷ΔA标准÷W=0.444× 0.149÷ 0.426÷0.02=7.7648 U/g土样。